Cómo separar el plasma de la sangre sin centrifugar
Extraiga la sangre en el tubo Vacutainer® codificado por colores indicado en el listado alfabético de la prueba. Para suero o plasma, extraiga aproximadamente 2 1/2 veces el volumen solicitado. Para el suero, deje que la sangre se coagule durante sesenta minutos y sepárela por centrifugación. Para el plasma y la sangre entera, llene completamente el Vacutainer siempre que sea posible para eliminar la dilución del anticoagulante o del conservante y mezcle inmediatamente la sangre invirtiendo el tubo suave y completamente de cinco a diez veces. Separar el plasma por centrifugación. Transfiera el suero, el plasma o la sangre total a un tubo de transporte de plástico (véase Tubos para muestras pediátricas más adelante). Para evitar lesiones y la exposición a material potencialmente infeccioso, no envíe el suero, el plasma o la sangre total congelados recibidos en tubos de vidrio o TSM (de vidrio o plástico).
Se recomiendan los tubos Vacutainer codificados por colores que aparecen en la cubierta interior, a menos que se indique lo contrario en el listado alfabético de pruebas. Se proporcionan tubos Vacutainer pediátricos codificados por colores para facilitar la manipulación especial.
Centrifugación de la sangre
El suero es la fracción líquida de la sangre total que se recoge después de dejar que la sangre se coagule. El coágulo se elimina por centrifugación y el sobrenadante resultante, denominado suero, se extrae cuidadosamente con una pipeta Pasteur. El plasma se produce cuando la sangre total se recoge en tubos tratados con un anticoagulante. La sangre no se coagula en el tubo de plasma. Las células se eliminan por centrifugación. El sobrenadante, denominado plasma, se extrae cuidadosamente del sedimento celular con una pipeta Pasteur.
Preparación del sueroRecoger la sangre entera en un tubo de ensayo tapado. Si se van a utilizar tubos comerciales, el investigador debe utilizar los tubos con tapa roja. Estos están disponibles en Becton Dickinson (BD). El nombre comercial de BD para los tubos de manipulación de sangre es Vacutainer. Después de la extracción de la sangre total, deje que la sangre se coagule dejándola a temperatura ambiente. Esto suele tardar entre 15 y 30 minutos. Retire el coágulo centrifugando a 1.000-2.000 x g durante 10 minutos en una centrífuga refrigerada. El sobrenadante resultante se denomina suero. Tras la centrifugación, es importante transferir inmediatamente el componente líquido (suero) a un tubo de polipropileno limpio utilizando una pipeta Pasteur. Las muestras deben mantenerse a 2-8°C mientras se manipulan. Si el suero no se analiza inmediatamente, debe repartirse en alícuotas de 0,5 ml, almacenarse y transportarse a -20°C o menos. Es importante evitar los ciclos de congelación-descongelación porque esto es perjudicial para muchos componentes del suero. Las muestras hemolizadas, ictéricas o lipémicas pueden invalidar ciertas pruebas.TOP
Diferencia entre el plasma y el suero
Para la mayoría de los análisis de laboratorio se necesita suero o plasma, es decir, la parte líquida de la sangre. Para obtener suero o plasma de la sangre, es necesario separar las células sanguíneas sólidas de la parte líquida. Este proceso de separación se consigue mediante la centrifugación. Pero, ¿cómo funciona realmente la centrifugación? ¿Todas las centrifugadoras funcionan de la misma manera? ¿Es fácil equivocarse?
La centrifugación es un proceso físico de separación basado en las diferentes relaciones de densidad de las sustancias. Por ejemplo, los componentes sólidos de la sangre, las células sanguíneas, tienen una densidad diferente a la de los componentes líquidos, el suero y el plasma. Así, durante la centrifugación, la fuerza centrífuga hace que las células sanguíneas más pesadas se acumulen en la parte inferior de los tubos de muestra, mientras que los componentes líquidos más ligeros se acumulan en la parte superior.
Para la mayoría de los análisis de laboratorio, se necesita suero o plasma. Hay que tener en cuenta que no todos los análisis, por ejemplo la electroforesis, pueden realizarse con plasma. Para saber qué tubo de muestra puede utilizarse para qué, consulte las especificaciones del laboratorio correspondiente o el prospecto de cada análisis.
Separación de suero y plasma de la sangre
Una vez recogidas las muestras de sangre total, el suero o el plasma deben separarse de las células lo antes posible (es decir, antes de 2 horas). Es muy recomendable enviar las muestras de suero para su análisis.
Una vez recogidas las muestras de sangre total, transfiéralas rápidamente a tubos con tapa o tapón – esto evitará la evaporación y la aerosolización de las partículas infecciosas durante la centrifugación. Deje que las muestras coagulen a temperatura ambiente durante 90 minutos para que se forme un coágulo completo. NO deje que las muestras coagulen a 4 grados centígrados, ya que esto causará hemólisis. Después de 90 minutos de coagulación a temperatura ambiente y antes de la centrifugación, pase un palo aplicador de madera a lo largo de la pared interior del tubo para interrumpir la adhesión del coágulo a la pared del tubo. Centrifugar las muestras a 2000 X g durante 15 minutos a temperatura ambiente. (Para convertir 2000 X g a rpm, consulte el manual de instrucciones de la centrífuga en cuestión).
Después de la centrifugación, retire el suero y colóquelo en un tubo de microcentrífuga de polipropileno o en un tubo de polipropileno de 12 X 75. Por favor, no almacene/envíe las muestras en tubos de vidrio. Etiquete claramente los tubos con la información de identificación. Identifique las muestras con números de forma secuencial. Esto puede requerir que usted genere una llave maestra con sus propios identificadores cruzados con los números secuenciales. Después de separar el suero de las células, las muestras de suero deben almacenarse a -20 grados centígrados en un congelador no helado hasta su envío.
